KONSTRUKSI GENGREEN FLOURESCENT PROTEIN (GFP) DAN GENREP (C1) KEDALAMPLASMID BINER pBI121

EKO, DARMA HUSADA (2013) KONSTRUKSI GENGREEN FLOURESCENT PROTEIN (GFP) DAN GENREP (C1) KEDALAMPLASMID BINER pBI121. Diploma thesis, Universitas Andalas.

[img]
Preview
Text
350.pdf - Published Version

Download (4MB) | Preview

Abstract

Gen Rep (C1) pada Geminivirus memiliki peran penting dalam partikel virus. Gen ini sering dipakai dalam pendekatan PDR (Pathogen Derived Resistance) untuk mengembangkan tanaman transgenik. GFP merupakan gen dari ubur-ubur yang banyak dimanfaatkan sebagai gen reporter dalam transformasi genetik. Vektor biner plasmid pBI121 merupakan vektor yang umum digunakan dalam transformasi genetik menggunakan Agrobacterium tumifaciens. T-DNA yang dimiliki pBI121 berperan dalam proses pentransferan DNA asing kedalam tanaman. Modifikasi T-DNA dilakukan dengan penyisipan gen pembawa ketahanan serta gen reporter. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengembangkan vektor plasmid biner pBI121 rekombinan gen Rep serta mengganti reporter gen GUS pada pBI121 dengan gen GFP. Dalam penelitian ini gen GFP didapat dengan merestriki plasmid pET15b- S65T-GFP menggunakan kombinasi enzim XbaI dan EcoRI kemudian dikloning kedalam pBI121 untuk mendapatkan plasmid pBI121 rekombinan gen GFP. Namun akibat keterbatasan stok gen GFP, proses pengkloning gen GFP tertunda. Kloning gen Rep dilakukan untuk mendapatkan plasmid pBI121 rekombinan gen Rep, gen Rep didapat dengan merestriksi plasmid pGEM-Rep dengan EcoRI, dan dilakukan transformasi kedalam A.tumifaciens menggunakan metode “electrophoration”. Pendeteksian keberhasilan transformasi dilanjutkan dengan metode PCR koloni serta isolasi dan PCR plasmid rekombinan menggunakan primer spesifik C1-TD21- SmaI/BamHINT. Dua koloni bakteri transforman yang mengandung gen Rep (C1) berhasil didapatkan. Kata Kunci : kloning, GFP, Rep, pBI121, transformasi genetik, PDR.

Item Type: Thesis (Diploma)
Subjects: S Agriculture > S Agriculture (General)
S Agriculture > SB Plant culture
Divisions: Fakultas Pertanian > Agroekoteknologi
Depositing User: Ms Ikmal Fitriyani Alfiah
Date Deposited: 02 Mar 2016 03:53
Last Modified: 02 Mar 2016 03:53
URI: http://scholar.unand.ac.id/id/eprint/2883

Actions (login required)

View Item View Item