Insersi Promotor Sintetik pSSPM2 Pada pET-28a(+):ansB Ke Dalam Sel E.coli BL21

Harisudin, Alif Faaiz (2026) Insersi Promotor Sintetik pSSPM2 Pada pET-28a(+):ansB Ke Dalam Sel E.coli BL21. S1 thesis, Universitas andalas.

	Text (cover dan abstrak) COVER DAN ABSTRAK_compressed.pdf - Published Version Download (198kB)
	Text (Bab 1 Pendahuluan) BAB 1 PENDAHULUAN.pdf - Published Version Download (238kB)
	Text (BAB 7 Kesimpulan) Kesimpulan.pdf - Published Version Download (237kB)
	Text (Daftar Pustaka) DAFTAR PUSTAKA.pdf - Published Version Download (256kB)
	Text FULL SKRIPSI_compressed.pdf - Published Version Restricted to Repository staff only until 20 August 2027. Download (1MB) | Request a copy

Abstract

Acute Lymphoblastic Leukemia (ALL) adalah keganasan yang ditandai dengan proliferasi sel-sel limfoid secara berlebihan. Salah satu pendekatan terapeutik yang telah dikembangkan memanfaatkan enzim L-asparaginase II, yang bekerja dengan menghidrolisis asam amino asparagin menjadi asam aspartat dan amonia, sehingga menghambat proliferasi sel kanker. Serratia plymuthica UBCF_13 diketahui membawa gen ansB yang mengkode enzim tersebut. Dalam rangka meningkatkan ekspresi gen ansB, dilakukan rekayasa genetika dengan menginsersikan promotor sintetik pSSPM2 ke dalam plasmid rekombinan pET-28a(+):ansB yang kemudian diekspresikan pada bakteri E. coli BL21. Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental yang dilakukan dengan menginsersikan fragmen promotor sintetik pSSPM2 ke dalam plasmid rekombinan pET-28a(+):ansB, yang selanjutnya diverifikasi melalui teknik PCR. Setelah keberadaan promotor sintetik terkonfirmasi, plasmid ditransformasikan dan dikloning ke dalam sel E. coli BL21 pada media selektif, kemudian diverifikasi kembali menggunakan teknik PCR dan restriksi endonuklease. Hasil elektroforesis menunjukkan keberhasilan pemotongan fragmen promotor sintetik pSSPM2 yang ditandai dengan munculnya pita DNA berukuran 184 bp. Elektroforesis hasil PCR ligasi juga menunjukkan hasil yang positif dengan terdeteksinya pita DNA berukuran 507 bp. Transformasi dan kloning plasmid rekombinan pET-28a(+):ansB:pSSPM2 selanjutnya dikonfirmasi melalui analisis PCR dan restriksi. Penelitian ini menyimpulkan bahwa insersi promotor sintetik pSSPM2 ke dalam plasmid rekombinan pET-28a(+):ansB, serta transformasi plasmid rekombinan pET-28a(+):ansB:pSSPM2 ke dalam bakteri E. coli BL21, telah berhasil dilakukan. Penggunaan promotor sintetik pSSPM2 diharapkan mampu meningkatkan ekspresi gen ansB secara lebih optimal dibandingkan promotor T7 yang terdapat pada plasmid pET-28a(+).

Actions (login required)

View Item