Optimasi Overekspresi Analog Insulin (Glargine) Rekombinan menggunakan Sistem Ekspresi Pichia pastoris

Ananda Zr, Yufva Pramudia (2025) Optimasi Overekspresi Analog Insulin (Glargine) Rekombinan menggunakan Sistem Ekspresi Pichia pastoris. S1 thesis, Universitas Andalas.

	Text (Cover dan Abstrak) Cover dan Abstrak.pdf - Published Version Download (335kB)
	Text (Bab 1 Pendahuluan) Bab 1 Pendahuluan.pdf - Published Version Download (290kB)
	Text (Bab 6 Penutup) Bab 6 Penutup.pdf - Published Version Download (273kB)
	Text (Daftar Pustaka) Daftar Pustaka.pdf - Published Version Download (390kB)
	Text (Skripsi Full Text) Full Text.pdf - Published Version Restricted to Repository staff only Download (11MB) | Request a copy

Abstract

Insulin glargine merupakan analog insulin rekombinan kerja panjang yang dirancang untuk memberikan kadar insulin basal yang stabil, dengan keunggulan klinis seperti frekuensi injeksi yang lebih rendah dan durasi kerja yang lebih lama. Optimalisasi produksinya menggunakan Pichia pastoris diperlukan untuk memenuhi kebutuhan terapi yang terus meningkat sekaligus mengurangi ketergantungan terhadap impor. Penelitian ini bersifat eksperimental yang mengevaluasi pengaruh berbagai parameter fermentasi jenis media (BMMY vs ½ BSM), konsentrasi metanol (2%, 2,5%, 3%), pH (4, 5, 6), dan waktu inkubasi (hingga 144 jam) terhadap ekspresi proinsulin glargine menggunakan P. pastoris strain X33. Ekspresi protein dianalisis melalui pengukuran OD₆₀₀, kuantifikasi protein total dengan metode Bradford, dan visualisasi pita protein melalui SDS-PAGE. Kondisi optimal untuk produksi insulin glargine rekombinan diperoleh pada media ½ BSM dengan induksi metanol 2%, pH 6, dan waktu inkubasi 96 jam yang memberikan nilai OD₆₀₀ akhir sebesar 68,27, konsentrasi protein sebesar 51,47 mg/L, serta pita protein yang jelas pada kisaran ~6,5 kDa. Kesimpulan dari penelitian ini menunjukkan bahwa optimasi parameter fermentasi secara signifikan meningkatkan produksi insulin glargine dalam P. pastoris, sehingga mendukung potensi penerapannya dalam skala bioteknologi yang lebih luas.

Actions (login required)

View Item